第一篇：临床基因扩增检验实验室临床实验报告管理制度

临床基因扩增检验实验室临床实验报告管理 制度

一、目的：

规范实验室实验报告的管理，保证检验结果及时准确的发出，确保实验报告的安全与保密。

二、适用范围：

临床实验室实验报告。

三、职责：

由临床基因扩增检验实验室专业技术人员制定程序文件，实验室负责人审核，科室主任批准实施。

四、要求 ：

1、检验报告的签发按实验数据审核及报告程序进行。

2、当发现检验报告中有缺陷而对其准确性及有效性产生怀疑时，应以通知实验室负责人、或科主任处理。

3、若某些原因应对已发出的检验报告做重大修改，应立即通知样品检验的申请人或检验报告的使用者，能收回的应立即收回，不能收回的应采用另外一个文件方式或作出补充声明。

4、检验报告申请人或使用者因特殊原因造成检验报告损坏或遗失时，凭据有效材料可向检验室申请补发，补发报告必须在备注栏说明补发报告。

5、样品检验的申请人或检验报告的使用者对检验报告的内容有异议时，可向实验室提出抱怨，也可向有关部门提

出申诉，按医疗纠纷申诉规定执行。

6、实验室工作人员及报告发送者不得以任何形式占有检验结果、数据和技术资料，不得公开透露检验结果及相关信息，不得遗失检验报告。

7、各部门工作人员必须严格遵循医学保密原则，对于违反规定者追究其相关责任。

第二篇：临床基因扩增检验实验室规章制度

临床基因扩增检验实验室规章制度

一、临床基因扩增检验实验室的规范化设置及其管理

临床基因扩增检验实验室四个隔开的工作区域中每一区域都须有专用的仪器设备。各区域都必须有明确的标记，以避免设备物品如加样器或试剂等从其各自的区域内移出从而造成不同的工作区域间设备物品发生混淆。进入各个工作区域必须严格遵循单一方向顺序，即只能从试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区(简称扩增区)至产物分析区，避免发生交叉污染。在不同的工作区域应使用不同颜色或有明显区别标志的工作服，以便于鉴别。此外，当工作者离开工作区时，不得将各区特定的工作服带出。

清洁方法不当也是污染发生的一个主要原因，因此实验室的清洁应按试剂贮存和准备区至扩增产物分析区的方向进行。不同的实验区域应有其各自的清洁用具以防止交叉污染。

(一)试剂贮存和准备区

下述操作在该区进行：贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。

(二)标本制备区

在该区进行下述操作：临床标本的保存，核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。

(三)扩增区

下述工作在本区内进行：DNA或cDNA扩增。此外，已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中，通常在第一轮扩增后必须打开反应管，因此巢式扩增有较高的污染危险性，第二次加样必须在本区内进行。

不能从本区再进入任何“上游”区域，可降低本区的气压以避免气溶胶从本区漏出。

(四)扩增产物分析区

下述操作在本区内进行：扩增片段的测定

二、临床基因扩增检验实验室质量保证

临床基因扩增检验实验室质量保证涉及到整个基因扩增检验的所有阶段，即测定分析前的标本采集处理、测定中的核酸提取、扩增和产物分析以及测定后的结果报告等。

第三篇：临床基因扩增检验实验室审核流程

重庆市临床检验中心 临床基因扩增实验室验收流程

由申请实验室提交申请文件，中心负责对文件进行审核。文件审核阶段为收到申请之日起，十五个工作日内给申请实验室回复文件审核结果；文件审核通过，则一个月内组织专家对实验室进行现场初审（专家主要邀请市内相关专家如：三医大附属医院及重医附属医院等专家），现场初审通过，则颁发初审合格证，允许其三个月的试运行。三个月后再组织专家进行现场正式验收。

若文件初审不通过，将通知申请实验室进行限期整改（一般两周），整改后再次提交，对文件进行再审核，同时有必要时将派专家现场去实验室进行预验收，考察其设置、标识、文件管理等是否准备好，预验收及文件整改通过，则1个月内组织专家对实验室进行现场初审。

若现场初审不通过，专家将提出限期整改意见（一般两周内），对实验室进行整改，两周后将整改报告提交至中心，由中心对整改报告进行审核，整改通过，则颁发初审合格证，允许其三个月的试运行。

试运行三个月后，再组织专家进行现场正式验收，此次验收包括标本的考核。正式验收合格，颁发临床基因扩增实验室验证；正式验收存在需整改的项目，将限期整改，整改合格后，颁发临床基因扩增实验室验证。正式验收不合格者，将停止审核，实验室整改后重新申请验收。

临床基因扩增实验室申请表见群共享，分初审申请表和复审申请表；申请复审的实验室，只需复审申请文件的审核和正式验收两个阶段。

如有凝问请咨询重庆市临检中心分子室郭元元，联系方式：023-63519127

第四篇：临床基因扩增检验实验室技术验收报告

(一)实验室所属法人单位名称:

地址:

邮编:

法定代表人:实验室负责人:联系人:email:

电话:传真:

(二)接受现场技术验收的实验室代表姓名及职务:

二.验收依据:卫生部下发文《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》和《临床基因扩增检验实验室工作规范》

三.验收时间:

四.验收评审地点:

五.技术验收结论:

合格,建议授予验收合格证书;

基本合格,尚存在部份缺陷,缺陷为项,限期改进,改进后授予验收合格证书;

不合格,停止验收,实验室改进后需重新申请.(一)验收中发现的问题及意见:

附件1:临床基因扩增检验实验室技术验收表;

附件2:临床基因扩增检验实验室技术验收意见汇总表;

附件3:整改要求.(二)需要说明的其它问题:□如果有的话见附件4;□无.(三)验收评审员姓名及签名:

主评审员姓名:签名:

评审员姓名:签名:

签名:

签名:

协调员姓名:签名:

签字时间:

(四)签字地点:

验收评审组意见:

附件1临床基因扩增检验实验室技术验收表

序号

验收内容

验收意见

符合基但本有

符缺

合陷

不符合缺此项

暂不需考核

评论与说明

实验室设置和设备

1.1

实验室的规范化分区:原则上应分为四个区,但如使用全自动扩增检测仪,区域可适当合并

1.2

各工作区的明确标记

1.3

实验室应配备开展临床基因扩增检测所需的所有仪器设备(包括质控物).保证《临床基因扩增检验实验室管理办法》和《临床基因扩增检验实验室工作规范》的有关要求得到满足.1.4

试剂贮存和准备区

冰箱;

混匀器;

微量加样器;

可移动紫外灯;

专用工作服和工作鞋;

消耗品(带滤心吸头,一次性手套等);

专用实验记录本,记号笔等.1.5

标本制备区

(a)冰箱(2~8℃和-20℃或-80℃);

高速台式冷冻离心机

(c)水浴箱和/或加热模块

(d)超净工作台或防污染罩

混匀器;

注:请在验收所选项打“

临床基因扩增检验实验室技术验收表

序号

验收内容

验收意见

符合基但本有

符缺

合陷

不符合缺此项

暂不需考核

评论与说明

微量加样器;

可移动紫外灯;

专用工作服和工作鞋;

消耗品(带滤心吸头,一次性手套等);

专用实验记录本,记号笔等.1.6

扩增区

(a)核酸扩增仪;

微量加样器;

可移动紫外灯;

专用工作服和工作鞋;

消耗品(带滤心吸头,一次性手套等);

专用实验记录本,记号笔等.1.7

扩增产物分析区

微量加样器;

可移动紫外灯;

专用工作服和工作鞋;

消耗品(带滤心吸头,一次性手套等);

专用实验记录本,记号笔等.2.设施和环境

2.1

实验室的设施,工作区域,能源,照明,采暖,通风等

应便于检测工作的正常进行.2.2

实验室应配备温度湿度计,稳压电源等.2.3

进入和使用实验室各区域应有明确的限制和控制.注:请在验收所选项打”“.临床基因扩增检验实验室技术验收表

序号

验收内容

验收意见

符合基但本有

符缺

合陷

不符合缺此项

暂不需考核

评论与说明

2.4

应有实验室”内务管理"(如人员流动,清洁等)制度;

2.5

实验室应有关化学试剂管理,废弃血清处理,生物防护等的措施

3.人员

3.1

实验室应配备足够数量的人员;这些人员必须经过培训,并取得上岗证.3.2

实验室应有培训计划和措施,保证其技术人员得到及时培训.3.3

实验室应保存其技术人员有关资格证书(如上岗证),培训,技能和经历,发表论文,科研成果等技术业绩档案.4.设备管理和质控物

4.1

所有设备应有维护程序文件;

*

如

第五篇：临床基因扩增检验实验室工作规范

为使基因扩增检验技术有效地应用于临床，更好地为疾病的预防、诊断和治疗服务，保证检验质量，特制定本规范。

一、临床基因扩增检验实验室的规范化设置及其管理

临床基因扩增检验实验室的规范化设置详见《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发

[2002]10号文)附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》。为避免污染，必须严格遵循《临床基因扩增检验实验室设置标准》设置临床基因扩增检验实验室。

临床基因扩增检验实验室四个隔开的工作区域中每一区域都须有专用的仪器设备。各区域都必须有明确的标记，以避免设备物品如加样器或试剂等从其各自的区域内移出从而造成不同的工作区域间设备物品发生混淆。进入各个工作区域必须严格遵循单一方向顺序，即只能从试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区(简称扩增区)至产物分析区，避免发生交叉污染。在不同的工作区域应使用不同颜色或有明显区别标志的工作服，以便于鉴别。此外，当工作者离开工作区时，不得将各区特定的工作服带出。

清洁方法不当也是污染发生的一个主要原因，因此实验室的清洁应按试剂贮存和准备区至扩增产物分析区的方向进行。不同的实验区域应有其各自的清洁用具以防止交叉污染。

(一)试剂贮存和准备区

下述操作在该区进行：贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。

贮存试剂和用于标本制备的材料应直接运送至试剂贮存和准备区，不能经过产物分析区。在打开含有反应混合液的离心管或试管前，应将其快速离心数秒。试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。当贮存试剂溶液经检查可用后，应将其分装贮存备用，避免由于经常打开反应管吸液而造成污染。

含反应混合液的离心管或试管在冰冻前都应快速离心数秒。大多数用于扩增的试剂都应冰冻贮存。为避免因单次反应取液而频繁的冻融主贮存试剂，应分装冰冻贮存试剂溶液。贮存试剂的分装体积根据通常在实验室内一次测定所需的扩增反应数来决定。

主反应混合液的组成成份尤其是聚合酶的适用性和稳定性通过预试验来检查，评价结果必须有书面报告。对于“热启动”技术(在第一个高温变性步骤后加入酶)，聚合酶也可不包含在主反应混合液中。

在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套，并经常更换。此外，操作中使用一次性帽子也是一个有效地防止污染的措施。

严禁用嘴吸取液体，加样器和吸头等必须经高压处理。

工作结束后必须立即对工作区进行清洁。本工作区的实验台表面应可耐受诸如次氯酸钠的化学物质的消毒清洁作用。实验台表面的紫外照射应方便有效。由于紫外照射的距离和能量对去污染的效果非常关键，因此可使用可移动紫外灯(254nm波长)，在工作完成后调至实验台上60~90cm内照射。由于扩增产物仅几百bp，对紫外线损伤不敏感，因此紫外照射扩增片段必须延长照射时间，最好是照射过夜。实验室及其设备的使用必须有日常记录。

(二)标本制备区

下述操作在该区进行：临床标本的保存，核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。

要正确使用加样器。由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染，所以应避免在本区内不必要的走动。可通过在本区内设立正压条件避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。为避免样本间的交叉污染，加 1

入待测核酸后，必须盖好含反应混合液的反应管。对具有潜在传染危险性的材料，必须有明确的样本处理和灭活程序。

用过的加样器吸头必须放入专门的消毒(例如含次氯酸钠溶液)容器内。实验室桌椅表面每次工作后都要清洁，实验材料(原始血标本、血清标本、提取中的标本与试剂的混合液等)如出现外溅，则必须分别处理并作出记录。

对实验台适当的紫外照射(254nm波长，与工作台面近距离)适合于灭活去污染。可移动紫外线管灯可用来确保工作后对实验台面的充分照射。

样本处理对核酸扩增有很大影响，必须使用有效的核酸提取方法，可在开展临床标本检测前对提取方法进行评价。

用于RNA扩增检测的样本制备好以后，应立即进行cDNA合成，因为cDNA链较RNA稳定，保存相对容易。为保证逆转录反应的需要，应在标本制备区设置一个以上的温育装置。

cDNA合成的理想温度依所使用的酶而定，倾向于使用一步法：即使用在扩增反应缓冲液条件下具有逆转录活性的热稳定的DNA聚合酶进行逆转录，其较cDNA合成后再开盖以调节缓冲液或加入聚合酶进行扩增发生污染的可能性降低。

待测RNA的cDNA拷贝须保存在标本制备区，不得在本区对样本进行PCR扩增。

(三)扩增区

下述工作在本区内进行：DNA或cDNA扩增。此外，已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中，通常在第一轮扩增后必须打开反应管，因此巢式扩增有较高的污染危险性，第二次加样必须在本区内进行。

不能从本区再进入任何“上游”区域，可降低本区的气压以避免气溶胶从本区漏出。

为避免气溶胶所致的污染，应尽量减少在本区内的走动。如有加样则应在超净台内进行。打开预处理过的反应混合液时必须防止液体溅出，尤其是在巢式扩增步骤之间。一个简单的方法是在打开反应管前快速离心数秒。可使用体积较小的离心机，因其所占实验台面小，易于用一只手操作，适合于大多数超净台。防潮屏障如石蜡油或轻矿物油也具有防污染作用，但必须注意的是，矿物油本身也可能成为一种持续性的污染源。用过的加样器必须注意清洁消毒。

完成操作及每天工作后都必须对实验室台面进行清洁和消毒，紫外照射方法与前面区域相同。如有溶液溅出，必须处理并作出记录。

(四)扩增产物分析区

下述操作在本区内进行：扩增片段的测定。

核酸扩增后产物的分析方法多种多样，如膜上或微孔板上探针杂交方法(同位素标记或非同位素标记)、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Southern转移、核酸测序方法等。目前国内的商品试剂盒绝大部分均采用非同位素标记的微孔板上探针杂交方法，即PCR-ELISA方法，也有膜上探针杂交方法。

本区是最主要的扩增产物污染来源，因此必须注意避免通过本区的物品及工作服将扩增产物带出。在使用PCR-ELISA方法检测扩增产物时，必须使用洗板机洗板，废液必须收集至1mol/L HC1中，并且不能在实验室内倾倒，而应至远离PCR实验室的地方弃掉。用过的吸头也必须放至1mol/L HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序处理，如焚烧。

由于本区有可能会用到某些可致基因突变和有毒物质如溴化乙锭、丙烯酰胺、甲醛或同位素等，故应注意实验人员的安全防护。

本区的清洁消毒和紫外照射方法同前面区域。本区如采用负压条件或减压情况下(如安装排风扇)可减少扩增产物从本区扩散至前面区域的可能性。

二、临床基因扩增检验实验室质量保证

临床基因扩增检验实验室质量保证涉及到整个基因扩增检验的所有阶段，即测定分析前的标本采集处理、测定中的核酸提取、扩增和产物分析以及测定后的结果报告等。

(一)标本的采集

常用于基因扩增检测的临床标本包括EDTA或枸橼酸钠抗凝全血或骨髓、血清或血浆、痰、脑脊液、尿及分泌物等。采血液等样本时，应使用一次性密闭容器，如真空采血管。当使用非密闭采样系统时，如尿、分泌物和骨髓的采样，必须注意防止来自采样者的皮屑或分泌物的污染。采样时必须戴一次性手套。玻璃器皿在使用前应高压处理，因为玻璃器皿常含有不易失活的RNA酶。最好是热灭菌，250℃烘烤4小时以上可使RNA酶永久性失活。

全血和骨髓标本必须进行抗凝处理。EDTA和枸橼酸盐是首选的抗凝剂。不能使用肝素抗凝，因为肝素是Taq酶的强抑制剂，而且在其后的核酸提取步骤中很难去除。

临床用于RNA(如HCV RNA)扩增检测的血标本建议进行抗凝处理，并尽快(3小时以内)分离血浆，以避免RNA的降解。如未作抗凝处理，则抽血后，必须在1小时内分离血清。

(二)标本的稳定化处理

用于DNA扩增检测的标本，采集后一般不需要特殊的稳定化处理，但标本应及时送至实验室。由于RNA易受RNA酶的降解，因此用于RNA测定的标本有时必须进行稳定化处理，如流行病学调查的现场采样。异硫氰酸胍盐(Guanidine thiocyanat