第一篇：猪伪狂犬病免疫防制技术探讨

猪伪狂犬病免疫防制技术探讨

猪伪狂犬病是最古老的猪病之一，世界范围内的兽医工作者对此病进行长期、深入而全面的研究，人们对该病的认识已经相当清楚，防制技术也很成熟。该病在我国的流行是最近十年的事情，在防制工作中，还有一些问题存在争议。现就其中争议比较多、比较集中的问题提出来，与同仁共同探讨。

1．灭活疫苗和弱毒草疫苗的应用。

四、五年前，这是一个争论最多的问题,主要涉及以下两方面：

1．1安全性。业界人士认为灭活疫苗很安全，而弱毒疫苗可能存在散毒和毒力返强等安全隐患。事实上，早在此前弱毒疫苗在欧美国家已经使用了数十年，证明其很安全。现在，大多数猪场已经接受了使用弱毒疫苗，几年的实践也证明了弱毒疫苗的安全性。

1．2免疫效力。一般来说，灭活疫苗能激发比弱毒疫苗更高的抗体。因此一些业内人士据此认为前者比后者的免疫效果好。显然，仅仅根据抗体水平的高低来判断疫苗的效力不够全面，因为机体依赖多种免疫机制抵抗病毒的感染，主要有干扰素、体液免疫、细胞免疫、局部免疫和超感染占位竞争等。灭活疫苗和弱毒疫苗在上述机制中所发挥的效力有较大差别，见表：

免疫机制

疫苗类型干扰素体液免疫细胞免疫局部免疫占位

灭活疫苗hyhyhy

弱毒疫苗

弱毒疫苗更加接近于病毒自然感染的情形，能激发机体多种免疫机制，对机体提供迅速而全面的保护。循环抗体（即体液免疫）在中和病毒方面可以发挥很重要的作用，但抗体的作用受到其所能达到的部位的限制，对进入细胞的病毒和病毒感染门户部位（如上呼吸道），抗体的中和作用很难发挥，这就有赖于细胞免疫和其它免疫机制的作用。一般来说，细胞免疫在抗病毒感染中起着更重要的作用。又由于除体液免疫以外的其它免疫机制作用十分迅速，因此弱毒疫苗在紧急接种方面优势明显。几年的临床应用验证了弱毒疫苗具有比灭活疫苗更好的免疫效果。

2．免疫程序。各猪场实施的免疫程序有一定差别，对小猪是否需要免疫的争论比较多。在江西省，大多数猪场仅对种猪进行免疫，以预防繁殖障碍，并通过初乳保护小猪。也有少部分猪场对仔猪进行免疫接种。若要从根本上控制伪狂犬病，仔猪的疫苗接种是必需的。因为仔猪不接种疫苗，一旦母源抗体下降了或消失了，它们就会受到野毒的感染，尽管这些猪不表现临床发病，但它们成为终身带毒者并向外排毒，增加环境感染压力。这样，野毒就在猪场内不断循环感染，威胁着猪群的安全。隐性感染还会降低猪的日增重和饲料报酬。

在生产正常情况下，笔者推荐种猪在配种前免疫2次，以后每四个月免疫一次。仔猪于是10周龄左右免疫一次。疾病爆发时需要全群普免。

3．滴鼻免疫。滴鼻免疫在家禽生产上应用十分普遍。在养猪生产上，伪狂犬疫苗的滴鼻免疫也取得了很大成功。滴鼻免疫的优点一是可以避免母源抗体的干扰，二是在病毒感染门户产生局部免疫。但是滴鼻免疫并不总是必需的，它是疾病爆发环境感染压力很大时的暂时应急方法，一旦疾病得到控制步入正常生产了，可以转换成常规途径接种疫苗。

4．免疫失败。免疫失败的情况较少发生，分析原因主要是：

4．1免疫程序不当。当猪群爆发伪狂犬病时，没有进行全群免疫，只是对一部分猪主要是种猪接种疫苗，这样整个环境感染压力没有从根本上得到缓解，临床上表现为情况有好转，但不理想，零星散发时有发生。有的是仔猪免疫周龄偏小，母源抗体干扰了免疫效果。

4．2免疫时机不当。在接种疫苗时，猪群已经感染了伪狂犬病毒处于发病的潜伏期，或感染了其它与繁殖障碍有关的疾病。在此情况下，母猪发生流产、早产等繁殖障碍。

5．免疫猪场的野毒抗体问题。最近，通过对一些疫苗免疫猪场进行了野毒抗体的监测，结果发现各猪场（无任接种何种疫苗）均有一定数量的猪野毒抗体呈阳性。但是阳性率较四年前已有大幅度的下降，之所以还存在野毒抗体阳性，是因为：

5．1一些猪（尤其是种猪）在接种疫苗前就感染了野毒，血清已经转阳，这些猪没有被淘汰，在以后的监测中，血清学监测中呈阳性。

5．2疫苗免疫能有效地减轻或防止伪狂犬病的临床症状，但并不能完全阻止病毒的潜伏性感染。而在现场，极少量的病毒就能引起猪发生血清转阳。

5．3大多数猪场仅对种猪进行免疫，仔猪生长到10周龄左右母源抗体已不具保护力，它们在出售前的任何时候都可能感染野毒并发生血清转阳，尽管这些猪不表现临床发病。

5．4监测结果表明，对所有猪都接种疫苗的猪群，野毒抗体阳性率显著低于仅对种猪接种疫苗的猪群。在管理条件、设施条件及猪群状况相近，免疫程序相同的情况下，接种不同类型的弱毒疫苗，猪群野毒抗体阳性率没有差异。

6．单基因缺失苗和多基因缺失苗。这是目前争论较多的问题，怎样认识这个问题，可从以下几方面来

第二篇：猪伪狂犬病免疫防制技术探讨

猪伪狂犬病免疫防制技术探讨猪伪狂犬病是最古老的猪病之一，世界范围内的兽医工作者对此病进行长期、深入而全面的研究，人们对该病的认识已经相当清楚，防制技术也很成熟。该病在我国的流行是最近十年的事情，在防制工作中，还有一些问题存在争议。现就其中争议比较多、比较集中的问题提出来，与同仁共同探讨。

1．灭活疫苗和弱毒草

疫苗的应用。

四、五年前，这是一个争论最多的问题,主要涉及以下两方面：

1．1安全性。业界人士认为灭活疫苗很安全，而弱毒疫苗可能存在散毒和毒力返强等安全隐患。事实上，早在此前弱毒疫苗在欧美国家已经使用了数十年，证明其很安全。现在，大多数猪场已经接受了使用弱毒疫苗，几年的实践也证明了弱毒疫苗的安全性。

1．2免疫效力。一般来说，灭活疫苗能激发比弱毒疫苗更高的抗体。因此一些业内人士据此认为前者比后者的免疫效果好。显然，仅仅根据抗体水平的高低来判断疫苗的效力不够全面，因为机体依赖多种免疫机制抵抗病毒的感染，主要有干扰素、体液免疫、细胞免疫、局部免疫和超感染占位竞争等。灭活疫苗和弱毒疫苗在上述机制中所发挥的效力有较大差别，见表：

免疫机制

疫苗类型干扰素体液免疫细胞免疫局部免疫占位

灭活疫苗hyhyhy

弱毒疫苗弱毒疫苗更加接近于病毒自然感染的情形，能激发机体多种免疫机制，对机体提供迅速而全面的保护。循环抗体（即体液免疫）在中和病毒方面可以发挥很重要的作用，但抗体的作用受到其所能达到的部位的限制，对进入细胞的病毒和病毒感染门户部位（如上呼吸道），抗体的中和作用很难发挥，这就有赖于细胞免疫和其它免疫机制的作用。一般来说，细胞免疫在抗病毒感染中起着更重要的作用。又由于除体液免疫以外的其它免疫机制作用十分迅速，因此弱毒疫苗在紧急接种方面优势明显。几年的临床应用验证了弱毒疫苗具有比灭活疫苗更好的免疫效果。

2．免疫程序。各猪场实施的免疫程序有一定差别，对小猪是否需要免疫的争论比较多。在江西省，大多数猪场仅对种猪进行免疫，以预防繁殖障碍，并通过初乳保护小猪。也有少部分猪场对仔猪进行免疫接种。若要从根本上控制伪狂犬病，仔猪的疫苗接种是必需的。因为仔猪不接种疫苗，一旦母源抗体下降了或消失了，它们就会受到野毒的感染，尽管这些猪不表现临床发病，但它们成为终身带毒者并向外排毒，增加环境感染压力。这样，野毒就在猪场内不断循环感染，威胁着猪群的安全。隐性感染还会降低猪的日增重和饲料报酬。

在生产正常情况下，笔者推荐种猪在配种前免疫2次，以后每四个月免疫一次。仔猪于是10周龄左右免疫一次。疾病爆发时需要全群普免。

3．滴鼻免疫。滴鼻免疫在家禽生产上应用十分普遍。在养猪生产上，伪狂犬疫苗的滴鼻免疫也取得了很大成功。滴鼻免疫的优点一是可以避免母源抗体的干扰，二是在病毒感染门户产生局部免疫。但是滴鼻免疫并不总是必需的，它是疾病爆发环境感染压力很大时的暂时应急方法，一旦疾病得到控制步入正常生产了，可以转换成常规途径接种疫苗。

4．免疫失败。免疫失败的情况较少发生，分析原因主要是：

4．1免疫程序不当。当猪群爆发伪狂犬病时，没有进行全群免疫，只是对一部分猪主要是种猪接种疫苗，这样整个环境感染压力没有从根本上得到缓解，临床上表现为情况有好转，但不理想，零星散发时有发生。有的是仔猪免疫周龄偏小，母源抗体干扰了免疫效果。

4．2免疫时机不当。在接种疫苗时，猪群已经感染了伪狂犬病毒处于发病的潜伏期，或感染了其它与繁殖障碍有关的疾病。在此情况下，母猪发生流产、早产等繁殖障碍。

5．免疫猪场的野毒抗体问题。最近，通过对一些疫苗免疫猪场进行了野毒抗体的监测，结果发现各猪场（无任接种何种疫苗）均有一定数量的猪野毒抗体呈阳性。但是阳性率较四年前已有大幅度的下降，之所以还存在野毒抗体阳性，是因为：

5．1一些猪（尤其是种猪）在接种疫苗前就感染了野毒，血清已经转阳，这些猪没有被淘汰，在以后的监测中，血清学监测中呈阳性。

5．2疫苗免疫能有效地减轻或防止伪狂犬病的临床症状，但并不能完全阻止病毒的潜伏性感染。而在现场，极少量的病毒就能引起猪发生血清转阳。

5．3大多数猪场仅对种猪进行免疫，仔猪生长到10周龄左右母源抗体已不具保护力，它们在出售前的任何时候都可能感染野毒并发生血清转阳，尽管这些猪不表现临床发病。

5．4监测结果表明，对所有猪都接种疫苗的猪群，野毒抗体阳性率显著低于仅对种猪接种疫苗的猪群。在管理条件、设施条件及猪群状况相近，免疫程序相同的情况下，接种不同类型的弱毒疫苗，猪群野毒抗体阳性率没有差异。

6．单基因缺失苗和多基因缺失苗。这是目前争论较多的问题，怎样认识这个问题，可从以下几方面来分

析：

6．1多基因缺失苗不等于多价苗。这是普通常识，多价苗含有多种抗原成份，免疫后对猪提供更多的保护。多基因缺失苗则是缺失多个基因，减少了一些抗原成份。当然减少的这些抗原成份对总体的免疫效果影响不大。

6．2基因缺失的目的。基因缺失的主要目的是为了鉴别免疫猪和野毒感染猪，为根除伪狂犬病提供血清学监测手段。目前，世界通用的是gE单克隆抗体ELISA试剂盒，单基因缺失苗和多基因缺失苗都能达到鉴别目的，从这一意义上来说，二者没有任何区别。

6．3免疫效力。目前还没有权威性的论著对单基因缺失苗和多基因缺失苗免疫效力之间的优劣做过评述，从所了解的各猪场实际应用看，二者对控制伪狂犬病均具有良好的效果。抗体水平的监测也没有发现二者之间存在差异。最近的研究表明，某些弱毒疫苗会移植至免疫猪的隐性靶组织即三叉神经元，并通过与伪狂犬野毒的超感染竞争，从而阻断隐性感染的发生。研究还表明，既缺失糖蛋白gE又缺失tk基因的弱毒苗在三叉神经节的移植能力弱。而阻断和减少野毒潜伏性感染在伪狂犬病的防制中是至关重要的。

6．4安全性。这是争论的焦点问题，主要是关于单基因缺失苗是否安全的争论。

6．4．1基因缺失在减毒方面有一定作用，但显然非常有限，疫苗的减毒主要依赖于继代培养。除伪狂犬病疫苗外，其它疫苗都没有缺失基因，其中家禽用疫苗有十多种，猪用疫苗有五、六种，人用疫苗有七、八种，如果说这些疫苗存在毒力返强或其它安全性问题，显然与事实不符。因此，不能因为某一种疫苗缺失基因，就过分夸大基因缺失在安全性方面的作用，甚至把基因缺失的多少作为衡量一个疫苗安全性的依据。

6．4．2从历史的角度看，单基因缺失疫苗（如Bartha株）是一个使用历史最长（1961年研制成功）、范围最广、数量最多的弱毒疫苗。数十年的应用实践已经表明这是一个免疫力和安全性都很好的疫苗株。因此，不能因为多基因缺失苗（如同时缺失TK基因）强调其安全性就反过来怀疑单基因缺失苗的安全性，这与思维逻辑不符，更与事实不符。

6．4．3从现实的角度看，单基因缺失苗仍然是世界范围内用来防制伪狂犬病的主要品种，在十分注重生物安全的欧美国家，生产和使用一种不安全的疫苗是令人难以想象的。

6．4．4到目前为止，已有几家外国公司的Bartha株单基因缺失弱毒苗获得了我国农业部的批准注册，被允许进口。我国也是一个越来越注重生物安全的国家，批准注册这些单基因缺失苗时，是从各个方面充分考虑、认证了其安全性因素，显然有关单基因缺失弱毒疫苗存在安全问题的说法不可信。

6．4．5**省几十个规模化猪场从1999年就开始使用单基因缺失弱毒苗，至今未发生安全性问题。曾有个别猪场在使用单基因缺失弱毒苗后，出现一些问题，但经实验室检测，问题不在疫苗，而是该猪场在接种疫苗时已经感染了其它繁殖障碍性疾病，猪场人员也表示，接种疫苗就已经有问题发生。这种偶然情况在其它类型的疫苗使用过程中也会碰到。

7．猪场能否使用不同类型的基因缺失弱毒疫苗。从理论上讲，不同的基因缺失弱毒疫苗有发生重组的可能，但生产实践中还没有观察到这种重组，或由重组引起的不良后果。在生产中也无法完全避免对同一头猪使用不同的疫苗，如商品猪场往往会从多个种猪场引种，各个种猪场使用的疫苗可能就不一样，它们和商品猪场使用的疫苗可能也不一样。

《猪伪狂犬病免疫防制技术探讨》

第三篇：猪伪狂犬病的表现形式及防制

猪伪狂犬病的表现形式及防制

猪伪狂犬病（Pseudorabies,PR）是危害养猪业最严重的传染病之一，给世界养猪业造成重大的经济损失，近年来许多国家报道此病有增多的趋势。我国于１９７４年在家猫中发现此病，以后逐渐在猪、牛等家畜中流行，成为我国养猪业不可忽视的主要传染病。

１猪伪狂犬病的表现形式

1.1妊娠母猪发生流产、死胎、木乃伊，在宁波Ｂ场，１９９６年５至８月份发生以产死胎为主，损失达２２００多头，死胎率在５５％，后经有关单位诊断为ＡＤ病。何启盖（１９９８）报道，１９９０年秋季某猪场３５头母猪共产仔３０５头，其中死胎２９０头，从死胎中分离出伪狂犬病病毒。徐沈涛（１９９９）报道，江西Ｔ猪场由此病引起的流产为7.２％死胎8.４％．猪细小病毒也可引起以母猪繁殖障碍为表现的疾病，但它主要侵害头胎母猪，以产木乃伊为主．而伪狂犬病侵害各种胎次的母猪，并以产死胎为主．

2.2以乳猪死亡为主，逐步延伸到培育猪和肉猪出生后外观健康的仔猪，从第２d天开始发病，３－４d时整窝死亡．赵建山（１９９８）报道，初生仔猪在２－３d时整窝突然发病，１－２d后基本死亡．姜达书（１９９８）报道，发病日龄早的确３－４d，普遍为７－１０d，少数可达３0d，徐沈涛（１９９９）报道，２－１０d的仔猪发病,死亡为26.27%。

伪狂犬病仔猪日龄在延长，这可能与发病母猪的母源抗体有关．

1.3母猪不育产过死胎或产后仔猪因发生伪狂犬病死亡的母猪，产后配种困

难．返情率可高达６０％以上，母猪空怀造成严重经济损失．补注伪狂犬病疫苗（每头４头份）、改善饲料、增强护理、加强配种对防治因狂犬病造成的母猪不育很有效．临床表现

ＡＤＶ的症状随病猪年龄的差异而有所变化．

2.１ 乳猪４周龄以内的仔猪感染后病情最为严重．新生仔猪产下后很健康，膘情也好，但在2－３日龄发病后，仔猪眼眶发红，闭目昏睡，体温在４１◦Ｃ左右，口角流出大量泡沫性唾液，有的呕吐或腹泻，初期听到刺激性声音可发出兴奋性鸣叫，后期则无反应．随后出现眼睑、口角、颌下水肿（这些症状可与低血糖、补铁制剂引起的中毒相鉴别），常在腹部出现粟粒大小的紫色斑点，严重时全身呈紫色，患猪步态不稳，有的只能后退，易跌倒，有时出现间歇性抽搐，角反张，一般持续４－１０min．病情最短的为4－６h，最长为５d，一旦出现明显的神经症状及拉黄色稀粪，绝大多数死亡，耐过的成为僵猪．

2.２ 仔猪（断奶后至３０kg阶段）症状与乳猪相似，只是轻微一些，其发病率与死亡率比乳猪低。对发病的３个猪场作粗略统计，发病率２５％，死亡率９５％以上。

2.３ 中猪（４月龄左右）症状轻微，低热，眼结膜发红，鼻镜潮湿，有鼻涕，体温40.5◦Ｃ左右，易被误认为流感。偶有脓性鼻涕，猪只呼吸困难，咳嗽，精神沉郁，食欲不振，有的呈“犬坐势”，有的呕吐或腹泻，１周后逐渐康复，重者可延长到２０d。若发现出僵直、惊厥、行走困难等神经症状，预后不良。

2.４ 母猪母猪发病，表现为厌食、便秘、震颤、眼眶膜炎或视觉消失。个

别发病严重的．．耳尖发紫，四肢叉开呈鹅步不能站立，有时头侧向一边，体温在４０◦Ｃ－４２◦Ｃ，最后衰竭死亡。怀孕母猪感染本病，则分娩延迟或提前，流产呀产木乃伊，流产的可达５０％，所产仔猪初生重小，弱仔在２－３d内死亡。

３病理变化

（１）鼻腕：急性死亡的乳猪，出现鼻腕骨化脓或脓性出血性炎症。（２）

喉头扁桃体水肿并伴以咽炎和喉头水肿，喉头常有纤维素坏死性假膜，喉粘膜点状出血。（３）淋巴结：肠系膜淋巴结和下颌淋巴结充血、肿胀或出血，咽背淋巴结肿胀、充血、出血、水肿，并有局部坏死。（４）心内膜：有点状出血、（５）肺：有小叶性肺炎，散在小的出血和坏死点有时可见肺水肿。（６）胃、小肠：有出血性炎症。（７）膀胱：有时粘膜亦有充血、出血。（８）脑：脑膜充血，脑血管明显增粗，脑脊液增多。（９）眼结膜：眼睑水肿、潮红，病重猪眼球突出，眼结膜充血。（１０）口腔硬腭、上臼齿附近粘膜充血、出血及糜烂，扁桃体充血、化脓坏死。（１１）肝、脾稍肿，有散在圆形、白色及略隆起的坏死灶。（１２）肾脏发白，有散在细小出血点，切面有坏死灶。

４防治体会

引进种猪要严格把关，要到中信度强的国家定点种猪场购买。对新引进种猪要隔离观察并及时注射疫苗。给种猪每年定期注射伪狂犬病疫苗，小猪在乳猪期和断奶后各注射１次。流行ＡＤ病毒的猪场，要严格执行隔离和淘汰制度。各猪舍管理人员严禁乱串，出入猪舍要消毒并换衣换鞋。

在确认病因后尽快使用疫苗是防治此病的根本。同时适当使用抗生素等药物。进行对症治疗，能防止并发症。

建议有关部门加强种猪检疫。经有关人员血清学调查，猪伪狂犬病阳性率很高。有些种猪场从未注射过疫苗，阳性种猪就向省内、外出售。说明现在不少种猪场对伪狂犬病的监测不够重视，在种猪苗的流通过程中应加强检疫。

疫苗似乎有治疗作用。对刚开始发病、病症较轻、还没有拉黄色稀粪的发病猪，包括有体温但在体表还没有出血点的仔猪采取紧急免疫，用哈尔滨兽医研究所生产的猪伪狂犬病弱毒疫苗或华中农大生产的基因缺失灭能苗加倍量注射，有２/３左右发病仔猪６d后恢复健康。发病猪场若有肉猪生长参差不齐，应考虑二免。

建议农牧防疫部门订免疫程序时，对猪伪狂病列入强制性常规免疫。

第四篇：伪狂犬病防制技术规

伪狂犬病防制技术规范

伪狂犬病（Pseudorabies,Pr 又名Aujeszky’s disease,AD）。是由疱疹病毒科猪疱疹病毒I型（伪狂犬病毒PrV）引起的各种家畜和野生动物以发热、奇痒（猪除外）及脑脊髓炎为特征的急性传染病。除猪以外的其它动物发病均以死亡而告终，但呈散发形式或地方疫源性疾病。该病对养猪业的危害最大，在猪呈爆发流行，常引起妊娠母猪发生流产、死胎、木乃伊胎、新生仔猪大量死亡，育肥猪发生严重的呼吸道症状和增重滞缓、种猪不育，给养猪业造成巨大的经济损失。世界动物卫生组织（Wold Organisation for Animal Health，简称OIE）将其列为B类动物疫病，我国将其列为二类动物疫病。

为了预防、控制和消灭伪狂犬病，依据（中华人民共和国动物防疫法）和共他相关法律法规，特制定本技术规范。

1．适用范围

本规范适用于中华人民共和国境内一切从事哺乳动物饲养、经营、使用、屠宰、加工、运输等相关活动中的动物疫病防治工作。

2．诊断

根据流行特点，临床特征和病理变化，结合乳胶凝集试验（LAT）和酶联免疫吸附试验（ELISA）作出初步诊断。确认需进一步做病毒中和试验（NT）或病毒分离鉴定或动物接种试验或聚合酶链反应（PCR）。

2．1 流行特点

本病与其他疱疹病毒病不同，宿主范围广，猪、牛、羊、犬、猫最易感，寒冷季节多发，本病在猪呈爆发流行，猪是伪狂犬病毒储存者和传染源，病猪、隐性感染猪和康复猪可以长期带毒。病毒在猪群中主要通过空气传播，通过呼吸道和消化道感染，也可通过胎盘感染胎儿，除猪以外的其它动物感染伪狂犬病毒后，发病均以死亡告终，但呈散发形式或地方疫源性疾病。

2．2 临床表现：

2．2．1 潜伏期一般为3-6天

2．2．2 牛、羊、犬、猫、兔等动物感染本病后以发热、兴奋、奇痒、脑脊髓炎症状，结果均以死亡转归。

2．2．3 母猪感染伪狂犬病毒后常发生流产、产死胎、弱仔、木乃伊胎。青年母猪和空怀母猪常出现返情、屡配不孕或不发情；公猪常出现睾丸肿胀、萎缩、性能下降、失去种用能力；新生仔猪大量死亡，15日龄内死亡率为100%；断奶仔猪发病20-30%，死亡率为10-20%；仔猪症状病初高烧、腹泻、呕吐、精神不振，随后出现转圈、震颤、鸣叫、昏睡等神经症状；育肥猪出现严重呼吸道症状，生长滞缓，饲料报酬降低。2．3 病理变化：

病理组织学呈现非化脓性脑炎变化，剖检脑膜瘀血、出血，肾脏布满针尖样出血点，其它大体剖检特征不明显。

2．4 实验室诊断：

2．4．1 病原学诊断：

2．4．1．1 动物接种：

采取病猪扁桃体，嗅球、脑和肺，用生理盐水或PBS（磷酸盐缓冲液）制成10%悬液，反复冻融三次后离心取上清液接种于家兔皮下或者小鼠脑内，（用于接种的家兔和小白鼠必须事先用乳胶凝集试验或ELISA检测伪狂犬病毒抗体阴性者才能用），家兔经2-5天或者小鼠2-10天发病死亡。家兔发病时先用舌舔接种部位，以后用力撕咬接种部位，使接种部位被撕咬伤、鲜红、出血，持续4-6小时，病兔衰竭，倒卧于一侧，痉挛，呼吸困难而死亡。小鼠不如家兔敏感，但明显表现兴奋不安，神经症状，奇痒和四肢麻痹而死亡。

2．4．1．2 鸡胚接种：

取上述上清液接种9-10日龄鸡胚绒毛尿囊腔，经3-4天后形成特征性痘疱样白斑，死亡的鸡胚神经系统出血导致胚胎颅腔突出，取尿囊液做病毒中和试验，进行病毒鉴定。

2．4．1．3 用细胞培养分离病毒，见附件一。

2．4．1．4 聚合酶链反应（PCR）诊断，见附件二。

2．4．1．5荧光抗体试验（见附件三）

2．4．2 血清学诊断（抗体检测）

2．4．2．1 微量中和试验（固定病毒、稀释血清）见附件四

2．4．2．2 酶联免疫吸附试验（见附件五）

2．4．2．3 乳胶凝集试验（见附件六）

2．4．2．4 琼脂扩散试验（见附件七）

2．4．2．5 区分强弱毒感染鉴别乳胶凝集试验（见附件八）

2．4．2．6 区分强弱毒感染鉴别ELISA（见附件九）

3．疫情报告

凡发现疑似疫情的单位和个人，均应及时报告所在地基层动物防疫组织或动物防疫监督机构。

接到报告后的基层防疫组织和动物防疫监督机构，按《动物疫情报告管理办法》的规定上报。

4．疫情处理

4．1 紧急免疫接种：对发病种母猪、种公猪，用gG单基因缺失灭活疫苗作紧急免疫接种注射，第一次注射后间隔4-6周后再加强免疫一次，以后按种猪免疫程序进行，对正在发病的猪场，仔猪采用TK-/gG-双基因缺失弱毒疫苗作超前

--免疫，